美國紅楓(Acer rubrum)的組織培養(yǎng)技術(shù)體系研究
發(fā)布者:華石紅楓 發(fā)布日期:2014-08-20 點(diǎn)擊次數(shù):3597490
美國紅楓(Acer rubrum’Brandywine’),系械樹科槭樹屬,高大落葉喬木,原產(chǎn)地在美國。美國紅楓適應(yīng)性強(qiáng),具有強(qiáng)度耐旱、耐溫、長勢迅猛的特性,是園林綠化的優(yōu)良樹種。目前美國紅楓研究的一個(gè)直接的目標(biāo)就是大量種苗的供給,而美國紅楓組培快繁技術(shù)的研究正是解決這一問題的有效途徑。本研究以美國紅楓的腋芽、帶芽莖段、葉片為材料,系統(tǒng)地研究了美國紅楓組織培養(yǎng)直接器官和間接器官發(fā)生途徑的各個(gè)培養(yǎng)階段中基本培養(yǎng)基、生長調(diào)節(jié)劑和其他添加劑等因素的影響,篩選出了各階段的適宜培養(yǎng)基,成功地獲得了美國紅楓組織培養(yǎng)再生植株,建立了系統(tǒng)的美國紅楓組織培養(yǎng)植株再生體系。
美國紅楓(Acer rubrum)的組織培養(yǎng)技術(shù)體系
主要研究成果如下:
(1)不同外植體材料消毒的難易程度相差較大,另外外植體消毒的難易程度也容易受到季節(jié)因素的影響。就美國紅楓外植體取材部位和取材時(shí)間來說,美國紅楓以莖段為外植體并在3月-5月取材消毒效果最好,其平均污染率僅有5.4%,平均存活率為88.5%。
(2)啟動(dòng)培養(yǎng)中,四種培養(yǎng)基中以WPM培養(yǎng)基萌芽率最高,IBA激素以0.5mg/L水平的萌芽率最高,6-BA激素以2.0mg/L水平的萌芽率最高,美國紅楓腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基組合為WPM+IBA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L
(3)愈傷組織誘導(dǎo)中,五個(gè)因素影響的主次順序?yàn)椋号囵B(yǎng)基>外植體>NAA>KT>6-BA。培養(yǎng)基種類中以WPM培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高,外植體中以莖段誘導(dǎo)率最高,NAA濃度中以0.7mg/L水平的誘導(dǎo)率最高,KT濃度中以0.6mg/L水平的誘導(dǎo)率最高,6-BA濃度中以0.4mg/L水平的誘導(dǎo)率最高,美國紅楓愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)方案為以莖段為外植體并配以WPM+NAA0.7mg/L+KT0.6mg/L+6-BA0.4mg/L培養(yǎng)基配方。
(4)美國紅楓愈傷組織接種在附加了不同激素種類不同濃度配比的培養(yǎng)基上培養(yǎng)30d后,均未能分化誘導(dǎo)出芽的分化,只有愈傷組織量的不斷增加,愈傷組織的顏色由淺黃色變?yōu)榈G、深綠,隨著繼代次數(shù)的增加,愈傷組織的質(zhì)量不斷下降。
(5)不同基本培養(yǎng)基及激素水平組合對美國紅楓試管苗生根率影響差異較大。極差分析結(jié)果顯示,四因素對試驗(yàn)結(jié)果影響的主次順序?yàn)椋?-BA>GA3>培養(yǎng)基>IBA。其中MS+IB A2.0mg/L+6-B AOmg/L+GA31.Omg/L這一組合生根率最高,高達(dá)93.3%,根據(jù)k值的大小,比較四個(gè)因素水平求得最優(yōu)組合仍為這一組合;其次是WPM+IBA1.5mg/L+GA30.5mg/L組合,生根率為80.0%。
(6)美國紅楓移栽前,閉、開瓶鍛煉對結(jié)果影響較大,閉瓶鍛煉6d后開瓶煉苗2d的移栽成活率最高,達(dá)86.7%,其次就是閉瓶鍛煉6d后開瓶煉苗3d,移栽成活率也達(dá)到了83.3%。不同基質(zhì)處理對美國紅楓組培苗移栽成活率有顯著性影響。其中最有利于栽植的基質(zhì)為沙與腐殖質(zhì)等比混合的基質(zhì),其平均成活率達(dá)到了81.1%;其次為腐殖質(zhì),成活率為60.0%。
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